利用NanoDropOne測(cè)量菌液的OD600值，是一個(gè)常規(guī)且成熟的功能。這大大擴(kuò)展了這臺(tái)儀器的使用場(chǎng)景，使其能從分子層面的定量，延伸到對(duì)生命體狀態(tài)的宏觀監(jiān)測(cè)。

一、核心解答：一臺(tái)儀器，兩種方式

    NanoDropOne可以測(cè)量OD600。事實(shí)上，無(wú)論是應(yīng)用列表，還是全球眾多實(shí)驗(yàn)室的日常使用，都將其視為一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)功能。

    這臺(tái)儀器提供了兩種測(cè)量OD600的方式，你可以根據(jù)手頭的樣品量和習(xí)慣來(lái)選擇：

    微基座模式(PedestalMethod)：這是NanoDrop的特色功能。只需2微升菌液，直接滴在檢測(cè)基座上，數(shù)秒內(nèi)即可出結(jié)果。它的優(yōu)勢(shì)在于樣品用量少、無(wú)需比色皿、速度快。

    比色皿模式(CuvetteMethod)：這個(gè)功能僅適用于NanoDropOneC型號(hào)。它像傳統(tǒng)分光光度計(jì)一樣，使用1厘米光程的比色皿進(jìn)行測(cè)量。

二、如何操作：以微基座模式為例

    整個(gè)過(guò)程還是熟悉的“點(diǎn)樣、測(cè)量、擦拭"三步曲，非常簡(jiǎn)單：

    開(kāi)機(jī)與選擇：開(kāi)機(jī)后，在觸摸屏主界面上找到并點(diǎn)擊“OD600"圖標(biāo)，進(jìn)入測(cè)量模式。

    清潔基座：用無(wú)塵紙蘸取少量去離子水，清潔上下基座的光纖表面，確保沒(méi)有上次測(cè)量的殘留。

    建立空白對(duì)照：吸取2微升用于培養(yǎng)細(xì)菌的空白培養(yǎng)基（如無(wú)菌LB液體培養(yǎng)基），加到下基座上，放下檢測(cè)臂，點(diǎn)擊“Blank"（空白）。

    上樣測(cè)量：抬起檢測(cè)臂，用干凈的無(wú)塵紙擦干上下基座。將待測(cè)的細(xì)菌培養(yǎng)液輕輕混勻，吸取2微升加到基座上，放下檢測(cè)臂，點(diǎn)擊“Measure"（測(cè)量）。

    讀取結(jié)果：儀器會(huì)顯示吸光度（OD600）和根據(jù)系數(shù)計(jì)算出的細(xì)胞濃度（cells/mL）。如果未輸入系數(shù)，則只顯示OD600值。

    清潔收尾：測(cè)量完成后，抬起檢測(cè)臂，用無(wú)塵紙清潔基座，為下一個(gè)樣品或關(guān)機(jī)做準(zhǔn)備。

三、結(jié)果解讀：如何看懂OD600數(shù)值

    屏幕上會(huì)直接顯示測(cè)量結(jié)果，主要有兩項(xiàng)：

    OD600：測(cè)得的吸光度值。

    CellConcentration：如果設(shè)定了細(xì)胞數(shù)量轉(zhuǎn)換系數(shù)，儀器會(huì)利用公式c=A*factor(其中c為細(xì)胞濃度,A為600nm處的吸光度,factor為轉(zhuǎn)換系數(shù))自動(dòng)計(jì)算出細(xì)胞濃度(cells/mL)。儀器默認(rèn)系數(shù)為1x10?，但建議根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)體系進(jìn)行校準(zhǔn)。

    幾點(diǎn)注意

    線性范圍：NanoDropOne的比色皿模式，準(zhǔn)確讀數(shù)通常在0.04到1.5A之間。為了保證數(shù)據(jù)可靠，當(dāng)測(cè)量值較高時(shí)，建議將菌液用新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行梯度稀釋后再測(cè)。

    默認(rèn)系數(shù)：儀器默認(rèn)的細(xì)胞轉(zhuǎn)換系數(shù)是1.00e+008(即1x10?)。這只是一個(gè)通用估算值，不同菌株、不同培養(yǎng)基都可能使真實(shí)的細(xì)胞數(shù)量與OD值的關(guān)系發(fā)生改變。

    混勻是關(guān)鍵：取樣前務(wù)必將菌液輕柔、混勻，避免細(xì)菌沉降導(dǎo)致測(cè)量誤差。

    排除干擾：如果培養(yǎng)基顏色較深，或者含有其他在600nm有吸收的物質(zhì)，可能會(huì)造成干擾。

總結(jié)

    總而言之，NanoDropOne可以測(cè)OD600，這是其眾多預(yù)設(shè)應(yīng)用中的一項(xiàng)。其核心價(jià)值在于，將原先需要大體積比色皿的宏觀測(cè)量，縮減為僅需2微升的微量操作，實(shí)現(xiàn)了核酸蛋白定量與細(xì)胞培養(yǎng)監(jiān)測(cè)在同一平臺(tái)上的無(wú)縫銜接。

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