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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章GIBCO胎牛血清該如何保存比較好呢?

GIBCO胎牛血清該如何保存比較好呢?

更新時(shí)間:2019-01-18點(diǎn)擊次數(shù):3185
  GIBCO胎牛血清是實(shí)驗(yàn)室常用的天然培養(yǎng)基。它富含各種營養(yǎng),但也容易因母牛存在的病毒感染而攜帶有病毒,從而給細(xì)胞培養(yǎng)帶來潛在的干擾。因此,不但要從源頭上保證懷孕的母牛是健康的,沒有各種傳染病(包括沒有瘋牛病疫情),屠宰場需在政府注冊過,而且在胎牛血清的質(zhì)檢中,也要進(jìn)行各種病毒檢查,以保證胎牛血清的品質(zhì)。而GIBCO胎牛血清的批號(hào),則保證了每個(gè)批次的生產(chǎn)都是可以追溯的。
GIBCO胎牛血清該如何保存
建議GIBCO胎牛血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
如何去除GIBCO胎牛血清中的脂肪酸呢?
GIBCO胎牛血清是常見的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基營養(yǎng)液,在大部分試驗(yàn)中是不需要對GIBCO胎牛血清中的脂肪酸進(jìn)行去除的,但是,在進(jìn)行某些特殊細(xì)胞培養(yǎng)的時(shí)候?yàn)榱吮WC實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和我們要讀胎牛血清中的某些成分進(jìn)行去除,常見的脂肪酸去除,我們一般用一下方法。
1.溶解。取適量的胎牛血清白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸餾水中,溶解溫度在23~27℃。 用濃度為0.2N的HCl,調(diào)節(jié)PH至3~3.5。
2.解析。充分溶解后的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中進(jìn)行冰水浴,同時(shí)持續(xù)攪拌,維持30min。
3.吸附。加入5%的活性炭,混勻,混懸液將混懸液移至冰水混合物中進(jìn)行冰水浴,同時(shí)持續(xù)攪拌,維持1小時(shí)。過濾,濾渣回收后再利用。
4.濃縮。 濾液用0.2N的NaOH調(diào)節(jié)PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超濾器進(jìn)行超濾濃縮。
5.凍干。將濃縮液按凍干曲線凍干,即將超濾后的濃縮液迅速冷凍至-40℃,持續(xù)1小時(shí)左右,升到-25℃,持續(xù)10~20小時(shí),再緩慢升溫至0℃,維持1~4小時(shí),升溫至保存溫度20℃,分裝為成品。
有的客戶不是很明白Gibco胎牛血清跟小牛血清有何不同,今天我們來簡單對比下兩種血清。
來源不同:Gibco胎牛血清是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。
用途與用法不同:某些細(xì)胞必需Gibco胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。
組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。

上一個(gè):血清的類別及作用!

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下一個(gè):細(xì)胞的基本概念

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